薄层色谱.doc

色谱分离法(raphy)色谱分离法是目前有机分析中使用最多,最有效的分离方法,许多化学物理性质相似的异构体,同系物以及多组分混合物的样品往往难以用简单的蒸馏、精馏、萃取、重结晶、升华等简单手段分开,而用色谱方法却能得到快速、准确的分离及测定。什么是色谱方法(Chtomatography)?最初,(茨维特)把干燥的叶子用石油醚萃取后,将小量的萃取液倾入充填有沉降碳酸钙的玻璃柱子的顶端,然后用石油醚淋洗,结果叶中的色素在碳酸钙柱上互相分离,形成不同颜色的色带,分列在柱上;随着淋洗液的流动,色带的分离越加明显。他把这种方法叫做“色谱法”,色谱的英文名称是chromatograph,它是由希腊文chromos(色彩)和grapho(记录)两字并合而成,字面上意义是颜色的记录。可以说茨维特在色谱方面做了开创性的工作,但以后的二十几年并未引起很多人的注意,直到1931年有人用充填氧化铝粉末的柱管将性质非常相似的α-胡萝卜素和β-胡萝卜素分离成功(在此之前,人们一直以为胡萝卜素是一种纯物质),并且得到的纯物质可做C、H元素定量分析用,这才引起了许多有机化学工作者的注意,认识到色谱法在分离混合物方面有广阔的前景,并且研究出许多新技术,例如分配色谱法、纸上色谱法、薄层色谱法、离子交换色谱法等。现在,人们所说的“色谱”一词的含义已经远不是Цвег所发现的那种色带,而是根据混合物中各组分在互不相溶的两相(固定相、流动相)中的吸附能力、分配系数或其它亲合能力的差异而设计的分离分析方法,它集分离与分析于一体,快速、简便、微量,成为分离分析复杂混合物的理想方法之一。现在,色谱法所涉及到的领域不仅限于分析化学,而且涉及到许多其它领域如石油化工、精细化工、近代电子技术、生命科学、食品科学、临床分析、考古学、甚至兴奋剂检测等。虽然目前在各种色谱法中茨维特所发现的那种色带已经没有普遍性,但由于这种名称在中外已沿用很久,众所周知,不宜更改。因此国家标准中仍定名为色谱法。色谱分离法的种类很多,根据流动相和固定相的特点,可以分为: columuchro.) 薄层色谱(TLCthinlayerchro.) 纸色谱(PCpaperchro.) 气相色谱(GCgaschro.) 高效液相色谱(HPLChighperformanceliquidchro.) 凝胶渗透色谱(GPCgelpermeationchro.) 离子交换色谱(IECironexchangchro.)…………这里我们主要介绍TLC、GC、HPLC。第一章薄层色谱法(TLC)一、简介 TLC──在铺成薄层的固体上进行色谱的方法。(简述TLC的操作及仪器) 优点:①操作容易,设备简单,易于掌握。②分离迅速(PC需几个小时到几十个小时,TLC只需十几分钟到几十分钟)。③灵敏度高(可检测10-5μg物质)。④固定相(与PC相比)、流动相(与GC相比)、显色剂(与PC相比)均可灵活选用。⑤样品用量可小(几微克~几十微克)可大(几毫克~几百毫克),可用于备色谱。⑥特别适用于热不稳定及难挥发样品。⑦技术多样化(如双向展开、多次展开等),可分离复杂样品。⑧不存在样品堵塞柱子而使柱效下降或柱子报废的问题。缺点:①不适合挥发性样品、②自动化程度低于GC、HPLC。③分离效果不及GC、HPLC,不能分离过