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人脐带血干细胞CD34+移植促进大鼠脊髓损伤神经功能恢复.pdf


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beplayapp体育下载列表 beplayapp体育下载介绍
中国协和医科大学
硕士学位论文
人脐带血干细胞CD34+移植促进大鼠脊髓损伤神经功能恢复
姓名:李洪钧
申请学位级别:硕士
专业:病理学与病理生理学
指导教师:韩忠朝

一~***磷酸盐缓冲液胎牛血清卵白素一生物素一过氧化物酶脊髓损伤辣根过氧化物酶讳逋蜒跄蚝塑罗丹明神经元核抗原羟乙基哌嗪乙磺酸造血干/祖细胞室温辕窬胛牛血清白蛋白去离子水细胞磁珠分离流式细胞仪异硫***酸荧光素中曩协和匮科大学一士研究生诒文.
淋巴细胞分离液过硼酸钠干细胞因子白细胞介素一苏木精&伊红过氧化氢微量注射器中一协和医辨大学硪士研究生论文
摘要神经系统的细胞移植已被用来研究和促进神经损伤的功能恢复。包埋、连续吻衅2捎妹庖咦榛ḿ觳釨昙瞧暄T煅8上人脐带血因含有丰富的多能干祖细胞,且来源丰富,成为一个可供细胞移植的细胞源。我们实验设计移植人脐带血干细胞到人为损伤的大在脊髓损伤的局部微环境存活、表达神经特异蛋白,并可促迸脊髓损动物模型制各取只健康大鼠,体重,雌雄不限,随机分组。采用腹腔戊巴比妥麻醉,在解剖显微镜下按ㄖ作脊髓半切模型。①脐血造血干细胞移植组:将脐血赴浦到脊髓损伤的头尾侧两个区域,每个区域注射,每肛赴鲆陨希哉兆椋涸诩顾杷鹕瞬课煌肺擦讲喾直鸹郝胞在脊髓微环境中存活、生长;应用免疫双重荧光染色法测定脐血造血干细胞的神经元特异蛋白和神经胶质纤维酸性蛋白鼠脊髓窬低呈敲庖吖δ芑砻獾牟课,观察移植细胞是否可以伤的行为和功能恢复。脐血细胞的分离取正常分娩的脐带血,法分离赴浦睬∈一溴脱氧尿核苷标记赴魑J咀俦昙牵現觳釨昙茄粜月省⒓鞘⒈赣谩#入,术后周、堋周、芄鄄齑笫笙轮ɑ疃榭觯对照改良评分标准进行运动功能评价。术后观察芎螅用ザ嗑奂兹┚墓嘧⒋λ蓝铮〕鍪芩鸩课患顾瑁潭ā⑹中膏曲和医科大学哥士研宄生话文
关键词:脐血千细胞移植脊髓损伤神经功能恢复的表达情况,判定其向神经细胞分化的能力。移植脐血干细胞可以存方法比较,术后小时两组神经功能评分比较尴灾圆义。免疫组化方法检测在脊髓病理切片中发现标记人脐血于细胞,免疫双重荧光染色法检测大约粜韵赴泶锷窬褐氏力强的多能干祖细胞,并具有免疫排斥水平低、配型简单和易于获得源,具有临床应用前景。活并促进大鼠脊髓神经功能恢复。统计分析采用独立样本ḿ煅榈异,术后一周至四周两组神经功能评分比较哂型臣蒲б维酸性蛋白表型,大约粜韵赴泶锷窬L匾斓白表型。我们移植人脐带血干细胞治疗脊髓损伤,结果表明移植脐斑于细胞可以存活并促进神经功能恢复,脐血干细胞是增殖能等多种优点,所以脐带血干细胞是治疗脊髓损伤的一个很好的细胞中田协和医并大学磺士研究生论文
に苈ú樘盟芄缈讶磕鱥籺;;.%.;.瓾甀.;瓼甊珺—.
前言神经系统的细胞移植已被用来研究和促进神经损伤的功能恢复~名脊髓损伤患者终生治疗和康复的费用将超过美元,国家是在岁以下的人群中。据统计每年有,嗬路⑸顾杷鹕性患者多丁C拦衷谟,颊哒馐芗顾杷鹕说恼勰ィ相当于每人中就有个患者。由于临床关怀的进步和继发些治疗研究包括挽救功能缺损、治疗慢性疼痛综合症、改交精神状态。具有惊人的治疗作用,但是由于伦理和道德的阎题。它的临床应用受到了很大限制。因此选择另一千细胞源替代胚胎组织用于细胞移植治疗神经系统疾患变得越来越迫切。人脐带血含有丰富的多能干祖外伤性损伤一直是造***类伤残率和死亡率最主要的原因,尤其±⑸⑶掖蠖嗍⑸昴昵崛巳骸C,人中就有嗽谖蠢匆荒昴谠馐芗顾杷鹕说耐纯啵行曰颊咚鹕吮扰死亡原因绨螂赘腥镜的有效治疗,至岁年龄段的脊髓损伤患者寿命明显延长%达到至岁T斐杉顾杷鹕说闹要原因有交通事故%⒆%为所有脊髓损伤患者的费用据估计每年将超过亿美元。因此,投资研究脊髓损伤治疗是最经济的,可以减轻国家巨大的财务负担。这胚胎干细胞移植到脑脊髓组织的不同部位可以分化成不同的组织表型K淙慌咛プ橹浦捕陨窬诵行员洹⒛约顾杷鹕思澳匀毖9H中■协和医科大掌硬士研究生论文
同亦可利用等优点。虽然脐带血干细胞移植已广泛用于血液病的治疗‘孓,但人脐带血干细胞移植到中枢神经系统是否可以存活和发育细胞,具有增殖能力强、来源丰富、采集方便及湫筒煌耆还不清楚。我们实验移植脐带血罸脊髓损伤大鼠,观察移植细胞是否可以促进脊髓损伤的行为和功能恢复。中田协和医科大学一士研究生论文
材料和方法嘲培养液二氨基联苯***恒温培养箱饕R瞧激光扫描共聚焦荧光显微镜甇%羟乙基淀粉淋巴细胞分离液赴パ∈约梁包括:瓒霞天津协和干细胞公司天津~.材料普通显微镜倒置显微镜医用台式离心机流式细胞仪解剖显微镜饕J约胎牛血清日本美国公司德国美国美国猂公司美国/美国产品%
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