还原糖的测定方法+发酵液还原糖的测定方法.doc

还原糖的测定方法发酵液还原糖的测定方法中间体化验操作法发酵液中糖含量的测定:1(原理:利用还原性糖类的自由配合基在碱性溶液中能将高价铜还原成为低价铜,过量的高价铜在酸性溶液中与碘化钾作用生成Cu2I2,同时析出碘,析出的碘以标准硫代硫酸钠(Na2S2O3)溶液滴定,同时做一空白对照,从两者之间求出糖的含量。反应式如下:酸?(C6H10O6)nn(C6H10O6)水解CuSO4+2NaOHCu(OH)2,Na2SO4CHOH——CH--COONa1Cu(OH)2,Cu,2H2OCHOH—COOKO—CH--COOKO-CHCOOKCu,CHOHO4O--CHCOOKCOONaHO--CHCOOK2Cu,NaOH,H2O(CHOH)4,Cu2O,O--CHCOOKCH2OHHO--CHCOONaO—CHCOOKCHOHOOK过量的Cu,2H2SO4O—CHCOOKCHOHOONa,,,CuSO4,Na,K,SO42-2CuSO4,4KI,2Cu?2K2SO4,I2(在酸化条件下)I2,2Na2S2O32NaI,Na2S4O622(试剂:1)斐林试剂直接配制法:将酒石酸钾钠800g溶于水中,再溶入硫酸铜160g,加入1N的NaOH溶液1318ml(或固体氢氧化钠580g),最后加入KI400g溶后,加入纯化水至总体积为10000ml,摇匀即得。2)斐林试剂贮备液的制备a(硫酸铜贮备液:称取硫酸铜(CuSO4?5H2O)800g加纯化水溶解(如浊可用玻璃棉过滤),使总体积成10000ml,摇匀即可。b(酒石酸钾钠贮备液:称取酒石酸钾钠400g,加纯化水使总体积为1000ml摇匀即得。c(斐林试剂混合液:取硫酸铜贮备液1000ml,加酒石酸钾钠贮备液1000ml,摇匀加11mol/L氢氧化钠(NaOH),最后加入碘化钾(KI)200g,溶后加入水,使总体积为5000ml。3)8N的硫酸:取36mol/ml的试剂H2SO4()222ml,缓缓注入778ml水中,放冷摇匀,即得。4)%淀粉指示剂:a(称取可溶性淀粉5g,溶于约50ml纯化水中。b(量取950ml纯化水于烧杯中,加热煮沸,将1)液倒入3搅拌,使其溶解,冷却至室温倒入1000ml试剂瓶中,置冰箱备用。5)20%碘化钾溶液:称取c(p碘化钾(KI)100克,用纯化水溶解至500ml,摇匀即得。6)4N盐酸(HCl):量取12N的C(P盐酸()334ml,加纯化水至1000ml,摇匀即得。7)2N盐酸(HCl):量取上述4N盐酸500ml,加纯化水500ml,摇匀即得。8)(KIO3)基准溶液:精确称取经研细,并在105?干燥至恒重的KIO3(AR),用纯化水溶入250ml容量瓶中,并稀释至刻度,,‰。WKIO3的当量浓度=250×(E/1000)==×==,=(KIO3的毫克当量)4610009)1N硫代硫酸钠(Na2S2O3)贮备液:称取碳酸钠(Na2CO3)20g,溶于约6000ml水中,加入五水亚硫酸钠(Na2SO3?5H2O)2000g