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专 业 学 位 研 究 生 学 位 论 文
论文题目（中文） 重组胶原蛋白的制备和区域稳定性研究
论文题目（外文） Preparation and Regional Stability of Recombinant
Collagen
研 究 生 姓 名 马良
学 位 类 别 专业硕士
专 业 学 位 领 域 胶原蛋白
学 位 级 别 硕士
校内导师姓名、职称 肖建喜 教授
校外导师单位、姓名
论文工作起止年月 2014 年 09 月至 2017 年 05 月
论 文 提 交 日 期 2017 年 05 月
论 文 答 辩 日 期 2017 年 05 月
学 位 授 予 日 期
校址：甘肃省兰州市
原 创 性 声 明
本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。学
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果做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。
本声明的法律责任由本人承担。
论文作者签名： 日 期：
重组胶原蛋白的制备和区域稳定性研究
摘要
胶原蛋白是人体内最重要的结构蛋白之一。它具有特征性的 (Gly-X-Y)n 重复序列，且其中 X
和 Y 位置的氨基酸通常是脯氨酸和羟脯氨酸。与从动物中提取的胶原蛋白相比，非动物来源的
重组胶原蛋白具有低免疫原性等优点，因此是生物医学的理想材料之一。本文围绕重组胶原蛋白
的制备和区域稳定性开展了三个方面的工作：（1）发酵过程中的条件优化。优化发酵条件包括：
培养基的选择、培养环境的 pH 以及诱导温度，从而实现 V-CL 的产率高达 。（2）重组
胶原蛋白的高效纯化。使用酸沉降的方法实现一步纯化胶原蛋白 V-CL。与传统的小型层析法相
比，酸沉降的方法更加简单、高效，并且无重金属离子的引入，更加环保。（3）胶原蛋白酶切
位点的稳定性。研究 V-CL 蛋白酶切位点的先后顺序，并与预测的稳定性特征进行比较。实验确
定的蛋白酶切先后顺序符合预测的稳定性特征，说明了蛋白的酶切是遵循特定顺序进行的。由于
胶原蛋白的酶切通常与消化疾病相关，本研究揭示了胶原蛋白和相关疾病模型的生物降解途径。
关键词：胶原蛋白，三重螺旋结构，大规模发酵，大规模纯化，稳定性
I
Preparation and Regional Stability of Recombinant Collagen
Abstract
Collagen is one of the most important structural proteins in the human body. It has a characteristic (Gly-X-Y) n
repeating sequence, and wherein the amino acids at the X and Y positions are proline and hydroxyproline.
Non-animal-derived recombinan