一种可改善啤酒起泡性能的啤酒酵母工程菌及制备方法.docx

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TGGATCTG,引入酶切位点SmaI,扩增两端带有IoxP位点的KanMX片断。经BamHI和SmaI双酶切后与同样双酶切(BamHI和SmaI)的质粒PUC18-PMBT相连,形成质粒pUC18-KPMBT。(5)bglS基因酿酒酵母表达载体的形成将重组质粒pUC18-KPMBT中的KanMX-PGKlp-MFαls_bglS_ADHlT片段用内切酶BamHI和EcoRI切下回收,然后与经同样双酶切的穿梭载体YEPlacl81相连,形成bglS基因在酿酒酵母中的表达载体YEPlacl81-KPMBT。-KPMBT的PCR、酶切和酶表达验证(I)PCR验证以质粒YEPIac181-KPMBT为模板,分别用KanMX-Pl+KanMX-P2、PGK1p-P1+ADH1t-P2、KanMX-Pl+ADHlT_P2进行PCR扩增KanMX、bglS表达单元、KanMX+bglS表达单元,结果如图5所示(理论值分别为1613、1976、3589bp)。(2)双酶切验证分别以