丹皮酚的提取与鉴定.pdf

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用于治疗皮肤瘙瘁、过敏性皮炎,湿疹等;丹皮酚口腔药膜具有直接通过口腔粘膜吸收起效特点;以丹皮酚为主料的消肿贴膏能有效抑制急性炎症和亚急性炎症反应。随着人们对丹皮酚药理活性的深入研究,丹皮酚还将扩大在,心血管、中枢神经系统疾病等方面的应用。,它能抑制细胞内氧自由基的产生,具有使皮肤增白,将皮肤沉积色素还原退色,消淤化斑等作用。如含丹皮酚的特效美容霜和驻颜面膜用于促进面部皮肤血液循环、活化衰老的表皮细胞、消除皱纹、去斑等作用;以其为主要成分做成的护发去屑香波和健美发胶具有保温护发、促进头发增生、止瘁等作用。此外,丹皮酚还广泛用于妇女、婴儿卫生用品、食品添加剂、保健茶品、饲料添加剂中。二、(1)掌握用水蒸汽蒸馏法提取丹皮酚的方法;(2)学会用薄层色谱法鉴别丹皮酚;,可以直接取丹皮酚获晶体,提取物纯度较高,尤其是水蒸汽蒸馏法成本低,且不需要特殊仪器。在鉴定丹皮酚时用薄层色谱法,简单,易行,重现性好,可靠性高,在对丹皮酚的提取中水蒸气蒸馏和薄层色谱法都具有重要意义。:水蒸气蒸馏法是指先蒸馏提取挥发性成分、将药渣再加水提取的方法,适用于含挥发性成分药材的提取,但其提取率远低于醇提法。水蒸气蒸馏法又可以分为直接水蒸气蒸馏法、碱溶液浸泡一水蒸气蒸馏法、酸溶液浸泡一水蒸气蒸馏法、盐溶液浸泡一水蒸气蒸馏法。研究发现,加盐蒸馏法是丹皮酚提取的最优方法。为了提高其在水中溶解度,通常采用有机溶剂、助溶剂、表面活性剂等途径。在蒸馏过程中可以加盐、先加碱后加酸等提高提取率。提取过程中,适宜范围的选择以及确保溶液贮存过程中的稳定性是关键。pH丹皮酚的鉴定原理:薄层扫描法简便易行,测定结果稳定,重现性好,准确白少岩等应用反射尤其在中药复方制剂中可较好地排除其他成分的干扰。可靠,:3法锯齿扫描法测定了牡丹皮中丹皮酚含量,以环己烷一***仿一无水乙醇(7:An=,波长A=274nm和1)为展开剂,将待测溶液在0下进行扫描,结果均较理想,证明薄层扫描法操作简便、省样、省时,(150g)粉碎牡丹皮细粉1500mL水,40gNaCl,15mL95%乙醇,40℃浸泡1h浸泡好的牡丹皮共水蒸馏馏出液静置析晶,过滤丹皮酚粗品滤液40mL无水乙醇溶解溶液200mL水,:⑴称取150g牡丹皮,用粉碎机粉碎,将粉碎好的牡丹皮细粉放入1000烧杯中,加入水,乙醇,于40℃的热水中浸泡;1500mL15mL95%40gNaCl,⑵浸泡40min后,取850mL药材进行水蒸气蒸馏,剩余药材继续浸泡;⑶2h后将剩余的650mL药材加入圆底烧瓶进行蒸馏;⑷收集所有馏出液,放置析晶,有白色针状结晶析出,滤取结晶,合并所有结晶产物,得丹皮酚粗品;⑸将粗品置于500mL烧杯中,加入40mL无水乙醇溶解,待溶解完全后加入200mL水,放置析晶;⑹待乙醇挥发完全后,过滤,收集所有结晶,得丹皮酚纯品。注意事项:若在制取过程中得不到白色结晶,只有油珠状物质沉出,可在蒸馏液中加入少量晶种,摩擦甁壁后,***萃取蒸馏液几次,合并萃取液后,加无水硫酸钠脱水,回收***至少量,放置析晶,抽滤,结晶用少量水洗2~3次,置于干燥器中干燥。(1):取少量纯品,在显微熔点测定仪测熔点,熔点49℃-51℃:①取本品约5mg,加乙醇1ml溶解后,,摇匀,加碳酸氢钠试液1滴,渐显橙红色②三***化铁反应取产品结晶少许,滴加5%三***化铁醇溶液,呈暗紫色。③与浓***反应取产品结晶少许,滴加浓***数滴,呈红棕色(2):取本品加乙醇溶解,制成每1ml中约含5μg的溶液,照分光光度法(中国药典2000年版二部附录ⅣA)测定,在314nm和274nm的波长处有最大吸收,在295nm和244nm的波长处有最小吸收。:取本品粉末1g,加***10ml,密塞,振摇10min,滤过,滤液挥干。残渣加***2ml使溶解,作为供试品,另取丹皮酚对照品,加***酸制成每1ml含2mg的溶液。作为对照品溶液。照薄层色谱法,吸取上述溶液各10微升,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(4:1:)为展开剂,展开,取出,晒干,喷以2%香草醛硫酸乙醇(1—﹥10)在105℃加热至斑点显清晰,供试品色谱中,与对照品色谱相应的位置,显相同颜色的斑点。,见下表:序号名称数量规格500ml/瓶AR125ml95%乙醇溶液分析纯******仿10ml3500ml/瓶AR43ml无水乙醇4AR500ml/瓶20ml/瓶***AR5500ml1500ml18L/桶6纯净水30gG7硅胶薄层层析500g/瓶10ml500ml/瓶8***酸AR-香草醛AR2500m9/酸乙10乙酸乙10ml500m/AR500m1ml/11AR冰醋500m环己12/40mlAR500m13/AR5ml***,见下表:序号名称数量型号GG-171000ml1个1圆底烧瓶GG-171000ml12个烧杯GG-17500ml31烧杯个GG-17250ml个14烧杯100ml15量筒个6量筒1个10ml个17直型冷凝管直径7mm长40cm18个玻璃棒BZ24129尾接管个19个110布氏漏斗GG-17500ml个11抽滤瓶1若干张滤纸12113玻璃漏斗个114研钵套1个15胶头滴管安排:×P-1100个17展开缸1碎,浸UV-三用紫外分析18紫外光谱台第二19熔点测定X-显微熔点测定仪得蒸馏水蒸气型数字控温电98-1-电热20台粗套第三天重结晶得精品第四天结构鉴定参考文献:1、丹皮酚的研究进展刘本臣中草药低38卷第11期2007年11月2、丹皮酚的药理活性和药物动力学研究进展李骅,王四旺,张邦乐亚太传统医药Asia-PacificTraditionalMedicine第6卷第2期2010年2月3、国家药品监督管理局国家药品标准4、蔡进章,蒋硕民。RP-HPLC法测定桂枝茯苓丸中丹皮酚的含量。浙江中西医结合杂志,2003,13(11):682-6835、水蒸汽蒸馏法提取丹皮酚工艺的研究康业斌商鸿生成玉梅西北农林科技大学学报然科学版第三十四卷第十一期2006年11月6、《中华人民共和国药典》第一部160页